Камелеон (белок) - Cameleon (protein)

Камелеон представляет собой сконструированный белок на основе варианта зеленый флуоресцентный белок используется для визуализации кальций уровни в живых клетках. Это генетически закодированный датчик кальция, созданный Роджер Ю. Цзянь и коллеги.[1] Название является объединением CaM (обычное сокращение от кальмодулин ) и хамелеон чтобы указать на тот факт, что сенсорный белок претерпевает изменение конформации и излучает измененную длину волны при связывании кальция с кальмодулином элемента Cameleon. Cameleon был первым генетически закодированным датчиком кальция, который можно было использовать для логометрических измерений, и первым, который был использован у трансгенных животных для регистрации активности нейронов и мышечных клеток.[2] Камелеон и другие генетически закодированные индикаторы кальция (GECI) нашли множество применений в нейробиология и другие области биологии. Он был создан методом фьюзинга BFP, кальмодулин, кальмодулин-связывающий пептид M13 и EGFP.[3]

Механизм

ДНК, кодирующая слитый белок камелеона, должна быть либо стабильно, либо временно введена в интересующую клетку. Белок, производимый клеткой в ​​соответствии с этой информацией ДНК, затем служит флуоресцентным индикатором концентрации кальция. В присутствии кальция Ca2+ связывается с M13, что позволяет кальмодулину оборачиваться вокруг домена M13. Это сближает два варианта белка GFP, что увеличивает FRET эффективность между ними.

Рекомендации

  1. ^ Мияваки А., Грисбек О., Хейм Р., Цзянь Р. Я. (1999). «Динамические и количественные измерения Ca2 + с использованием улучшенных Cameleon». Proc Natl Acad Sci USA. 96 (5): 2135–40. Bibcode:1999ПНАС ... 96.2135М. Дои:10.1073 / пнас.96.5.2135. ЧВК  26749. PMID  10051607.
  2. ^ Керр Р., Лев-Рам В., Бэрд Дж., Винсент П., Цзянь Р. Ю., Шафер В. Р. (2000). «Оптическая визуализация переходных процессов кальция в нейронах и мышцах глотки C. elegans». Нейрон. 26: 583–94. Дои:10.1016 / s0896-6273 (00) 81196-4. PMID  10896155.
  3. ^ Мияваки А., Ллопис Дж., Хейм Р. и др. (1997). «Флуоресцентные индикаторы Са2 + на основе зеленых флуоресцентных белков и кальмодулина». Природа. 388 (6645): 882–7. Bibcode:1997Натура.388..882М. Дои:10.1038/42264. PMID  9278050.